为充分发挥我院中心实验室对教学科研的支撑和服务作用,加强我院研究生及医务人员对实验资源的了解和使用,中心实验室于2020年11月10日至13日在科研教学楼九楼开展了为期4天的Western blot实验技能操作培训。
培训内容主要分为三个部分,首先是蛋白质提取、蛋白浓度的测定和聚丙烯酰胺凝胶的配制,中心实验室张晶晶副主任为学员们介绍了超声破碎仪的参数设置、使用方法及操作注意事项,紧接着,在培训教师的操作演练后,学员们三至四人为一组进行分组练习。培训第二部分内容包括蛋白质跑胶,将不同分子量的蛋白质在电泳胶分子筛的作用下彼此分离开,蛋白质转膜,封闭孵育,一抗孵育——免疫杂交。4℃孵育一抗过夜后,紧接着进行二抗孵育,扫膜结果分析。培训教师在细致操作的同时对每个步骤的操作注意事项进行详细讲解,使学员们记忆深刻。
为了使学员们积极参与到本次培训中,最后安排对学员们整个培训项目相继进行考核,并且需要张贴本次培训过程最终的实验结果图,24名学员在培训教师的指导下,进行了为期四天的培训,培训班课程安排很紧凑,学员们学习热情高涨,每天准时准点开始培训,培训过程中专注认真,积极思考,并且在一天的培训结束后,及时对当天的授课内容进行回顾梳理,细节的整理,在考核统计的数据中可以看出,学员们对Western blot实验操作技能均有不同程度的掌握。
小鼠脑组织GAPDH蛋白免疫印迹结果
Western blot是分子生物学中最基本的一门实验技术,可以用于基因在蛋白水平的表达研究,抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面,通过这次实践技能操作培训,使学员们在前期理论基础的认识上,对其有了更加直观、深刻的理解,还需要日后勤加练习,熟能生巧,为科研之路奠定良好的基础。
✦ 供稿丨中心实验室 张一
✦ 编辑丨宣传科